康老师

pcr技术从哪端开始复制

2018-02-25 01:53:22
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PCR反应中是从引物的3‘端开始合成新DNA链的。所以新合成的DNA链中,原来的引物在5‘端,新加入的碱基在3‘端。 引物3’端为关键碱基,是PCR延伸的起始端,不能进行任何修饰,也不能形成二级结构的可能,一般3‘端也不能发生错配,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

5’端无严格限制,只起限定PCR产物长度的作用,对扩增特异性影响不大,因此常用来引进修饰位点或标记物。 引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。

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